在細(xì)胞生物學(xué)領(lǐng)域,熒光探針是研究細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能的重要工具。利用細(xì)胞器熒光探針選擇性地與細(xì)胞器結(jié)合,然后通過激光掃描共聚焦顯微鏡觀察,不僅可以獲得高清晰度的亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)圖像,還可以動(dòng)態(tài)觀察活細(xì)胞的形態(tài)變化。細(xì)胞的病理和生理變化可以通過熒光多重染色,免疫組織化學(xué)和原位雜交在分子生物學(xué)水平上進(jìn)行定量研究。它還可用于分析細(xì)胞能量代謝、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、膜電位變化、細(xì)胞凋亡和細(xì)胞類型的分化。
核探測
核結(jié)構(gòu)可以通過核蛋白染色或核酸直接染色選擇性地觀察。我們提供的細(xì)胞通透性核酸染料可以直接染色活細(xì)胞或組織,以標(biāo)記細(xì)胞在組織中的分布。跟蹤從有絲分裂到細(xì)胞凋亡的整個(gè)過程中的核變化。
細(xì)胞質(zhì)探針
細(xì)胞質(zhì)由細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)、內(nèi)膜系統(tǒng)、細(xì)胞骨架和包涵體組成,是生命活動(dòng)的主要場所。親脂性染料一般可用作等離子膜染料,但內(nèi)化很快,因此用于成像的時(shí)間很短。盡管不同細(xì)胞類型的質(zhì)膜染色存在差異,但熒光標(biāo)記的凝集素,如小麥胚芽凝集素,仍被廣泛使用。
線粒體探針
線粒體是細(xì)胞的能量工廠。因其參與細(xì)胞凋亡,也成為近年來的研究熱點(diǎn)。線粒體的主要熒光探針有JC-1、羅丹明123和MitoTracker系列探針。
溶酶體探針
溶酶體是被含有一系列酸性水解酶的單層膜蛋白包圍的體。溶酶體含有多種酶,如糖苷酶、酸性磷酸酶、彈性蛋白酶、組織蛋白酶等。弱堿性胺選擇性地聚集在低pH值的細(xì)胞內(nèi)室中,可用于研究溶酶體的生物合成和發(fā)病機(jī)制。常用的一種是DAMP,它不發(fā)出熒光,需要與抗DNP抗體結(jié)合使用以觀察染色模式。中性紅和吖啶橙等熒光探針也常用于酸性細(xì)胞器的染色,但它們?nèi)狈μ禺愋浴?/span>
高爾基體復(fù)合物探針
高爾基體復(fù)合物的功能是從粗糙的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)加工、濃縮、儲(chǔ)存和運(yùn)輸?shù)鞍踪|(zhì),最終形成分泌囊泡。高爾基體復(fù)合物的熒光探針主要是NBD C6-神經(jīng)酰胺和BODIPY FL C5-神經(jīng)酰胺。
內(nèi)質(zhì)網(wǎng)探針
常用的DiOC6(3)和類似的DiOC5(3)屬于短鏈羰基花青染料,廣泛應(yīng)用于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的研究,包括神經(jīng)元和酵母中內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的結(jié)構(gòu)功能和動(dòng)力學(xué)。以及不同細(xì)胞類型中內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、線粒體和微管之間的形態(tài)關(guān)系。