iLite ®基于細胞的檢測基于簡(jiǎn)單的報告基因技術(shù)。對特定靶標或配體具有特異性的受體在細胞表面表達。一旦配體與受體結合,就會(huì )觸發(fā)細胞內信號級聯(lián),從而導致啟動(dòng)子區域與報告基因融合,在本例中為螢火蟲(chóng)熒光素酶。報告基因的激活以及底物的添加將產(chǎn)生光。光量與與受體結合的配體的量和活性相關(guān)。
就iLite技術(shù)而言,存在第二個(gè)報告基因,此處顯示為海腎熒光素酶。該報告基因受到組成型啟動(dòng)子的控制,因此在任何活細胞中始終處于活躍狀態(tài)。換句話(huà)說(shuō),從第二個(gè)報告基因產(chǎn)生的光量將與活細胞的數量相關(guān),因此可用于標準化結果以補償細胞數量的差異。
iLite技術(shù)提供了一種基于細胞的功能檢測形式,具有許多通常與配體結合檢測相關(guān)的功能和優(yōu)點(diǎn)。該技術(shù)基于報告基因格式,已針對整個(gè)藥物開(kāi)發(fā)過(guò)程中的應用進(jìn)行了修改和調整。
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