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免疫組織化學(xué)工作流程

更新時(shí)間:2023-11-22      點(diǎn)擊次數:284

VECTASTAIN ®  ABC 系統使我們成為免疫組織化學(xué) (IHC) 和免疫細胞化學(xué) (ICC) 領(lǐng)域的先驅?zhuān)⑶椅覀冊谶@些領(lǐng)域仍然是值得信賴(lài)的品牌。我們的產(chǎn)品因其高靈敏度、低背景、可靠性、再現性和價(jià)值定價(jià)而受到好評。我們提供許多不同的檢測系統來(lái)適應廣泛的實(shí)驗優(yōu)先事項。

為您的 IHC 檢測選擇合適的試劑是優(yōu)化實(shí)驗方案的重要組成部分。 Vector Laboratories 是您 IHC 工作流程每個(gè)步驟中優(yōu)質(zhì)標記和檢測產(chǎn)品的資源。

載玻片準備

· 大化組織切片在載玻片上的保留和粘附。

· 劃分和隔離各個(gè)部分以減少試劑使用或進(jìn)行離散處理。

抗原修復

使用規定的 pH 值和鹽溶液提高醛固定制劑的組織抗原性(“免疫反應性")。醛固定(例如福爾馬林)和石蠟包埋過(guò)程中的熱暴露相結合會(huì )使表位難以檢測。在抗原修復過(guò)程中,組織會(huì )受到緩沖溶液和高溫的組合處理,這會(huì )導致蛋白質(zhì)發(fā)生構象變化,從而暴露抗原以供檢測。

淬火/阻斷

使用封閉溶液減少或消除組織切片和細胞制劑上不需要的背景(非特異性)染色。非特異性染色可能是由內源酶或組織成分引起的,包括內源酶活性、Fc 受體的存在或檢測試劑與組織或細胞蛋白和其他大分子的相互作用。根據陰性對照切片的結果選擇封閉溶液。

一抗/凝集素

使用經(jīng)過(guò)驗證的特定標記物來(lái)識別和定位細胞或組織制劑中的靶蛋白抗原或糖蛋白部分。選擇一抗或凝集素時(shí),請考慮組織種類(lèi)和組織制備方法(例如固定),以確保與靶標特異性結合。

二抗

選擇高度純化和最佳偶聯(lián)的檢測試劑以滿(mǎn)足檢測條件,例如一抗種類(lèi)、組織種類(lèi)、靶標豐度和易用性(濃縮或即用型)。

三級試劑

如果需要,提高檢測的靈敏度,以可視化弱或短暫表達、上調或未知(例如,基因敲入研究)抗原。

底物/顯色劑

使用酶特異性顯色顯色來(lái)可視化您的目標蛋白抗原及其細胞和/或細胞外定位和相對表達水平。選擇符合您顏色偏好且與其他系統試劑兼容的酶底物(例如復染劑、封固劑和其他底物(如果多重檢測))。

復染

使用對比核染色來(lái)澄清異質(zhì)形態(tài)結構內的靶抗原信號。這有助于闡明組織中的細胞結構和特定染色模式。選擇與酶底物形成對比且與底物和封固劑化學(xué)相容的復染劑(藍色、綠色或紅色)。

蓋玻片/封片

保留目標抗原染色劑以供短期或無(wú)限期存儲和存檔。選擇與您的底物和復染劑兼容的封固劑。使用非水封固劑封固要存檔的載玻片,或使用水性封固劑保存長(cháng)達數年。


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