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VITROGEL 水凝膠的多種細胞培養方法

更新時(shí)間:2023-12-19      點(diǎn)擊次數:505

XENO-FREE 生物功能 VitroGel 水凝膠系統適用于許多 3D 細胞培養和應用。選擇“即用型"水凝膠系統來(lái)優(yōu)化配方和簡(jiǎn)單的操作過(guò)程,或者選擇高濃度水凝膠系統,通過(guò)“混合與匹配"和水凝膠的調整來(lái)創(chuàng )建定制的微環(huán)境。有多種方法可以使用我們的水凝膠系統來(lái)滿(mǎn)足許多研究需求。為了展示我們的水凝膠的靈活性,我們列出了五種可以使用我們的水凝膠進(jìn)行的常規細胞培養方法:3D 細胞培養、2D 水凝膠涂層、靜態(tài)懸浮培養、水凝膠細胞珠以及作為可注射載體。這五種培養方法適用于我們所有即用型 VitroGel 和高濃度 VitroGel 系統。用這些方法培養的細胞可以很容易地收獲VitroGel® 細胞恢復解決方案用于下游分析或傳代培養。


3D 細胞培養

VitroGel 系統是 3D 細胞培養的理想選擇。只需在室溫下將 VitroGel 溶液與細胞懸浮液混合,轉移到培養板并添加頂部培養基,細胞就可以進(jìn)行孵育。這種 3D 培養方法實(shí)現了完整的細胞封裝,從而增強了細胞與水凝膠基質(zhì)的相互作用。許多下游分析,如藥物篩選、免疫熒光分析和細胞毒性測定,可以直接在水凝膠中進(jìn)行。

二維水凝膠涂層

2D 水凝膠涂層方法非常適合在傳統 2D 培養和 3D 細胞封裝培養之間架起橋梁。通過(guò)在室溫下將 VitroGel 溶液與細胞培養基混合并轉移至培養板,可以將 VitroGel 作為厚層水凝膠涂覆在培養板的底部。細胞可以直接添加到水凝膠的頂部。 2D 水凝膠涂層方法允許細胞與功能性水凝膠物質(zhì)相互作用/浸入其中,并保持將表面暴露于頂部介質(zhì)的性能。當細胞在水凝膠表面遷移/聚集時(shí),會(huì )發(fā)生快速細胞球體形成。 2D 水凝膠涂層方法可作為與 3D 細胞培養方法結合的替代共培養方法:將一種細胞類(lèi)型封裝在水凝膠中進(jìn)行 3D 培養,然后在水凝膠頂部添加另一種類(lèi)型的細胞作為 2D 涂層培養。 2D 涂層 VitroGel 還可以成為研究細胞侵襲、血管生成測定和逐層共培養的強大系統。除了 2D 厚凝膠涂層外,VitroGel 還可以稀釋用于薄凝膠涂層方法。

靜態(tài)懸浮培養


3D靜態(tài)懸浮培養方案是VitroGel水凝膠系統的培養方法。通過(guò)簡(jiǎn)單地將 VitroGel 溶液和細胞混合形成軟水凝膠,研究人員可以進(jìn)一步直接將水凝膠-細胞混合物與額外的培養基混合,制成水凝膠-細胞懸浮液。水凝膠基質(zhì)分散在細胞培養基中可以增加整個(gè)混合物的粘度,并幫助細胞在不需要強烈攪拌的情況下保持懸浮狀態(tài)。 3D靜態(tài)懸浮培養物易于制備,并且通過(guò)簡(jiǎn)單地改變水凝膠和細胞培養基的混合比例,可以靈活地調整各種細胞類(lèi)型和接種密度的最終粘度。例如,研究人員可以使用固定的2:1(水凝膠溶液:細胞,v/v)來(lái)制備水凝膠-細胞混合物,然后將其與細胞培養基以1:1至1:10的比例混合,以獲得不同粘度的水凝膠-細胞混合物。最終的水凝膠細胞懸浮液。這種培養方法可輕松用于實(shí)驗室規?;虼笮凸I(yè)規模的細胞培養規模擴大。研究實(shí)驗室不需要花哨的生物反應器或昂貴的培養容器。我們將其用于干細胞球體HEK293 球體的生成。該方法還適用于我們所有即用型 VitroGel 和高濃度 VitroGel 系統。 VitroGel 靜態(tài)懸浮培養產(chǎn)生的細胞可以通過(guò)離心輕松收獲。



水凝膠細胞珠

作為一種可注射水凝膠系統,VitroGel 具有剪切稀化和快速恢復流變特性。水凝膠溶液可以與細胞混合形成軟水凝膠,然后可以將其作為液滴添加到細胞培養基中以形成水凝膠-細胞珠。這種培養方法不僅將細胞封裝在水凝膠基質(zhì)內以增強細胞與基質(zhì)的相互作用,而且還允許整個(gè)水凝膠-細胞珠懸浮在細胞培養基中以獲得最佳的培養基滲透。研究人員可以通過(guò)改變添加到培養基中的液滴的體積來(lái)調整水凝膠珠的大小。對于需要牢固附著(zhù)才能生長(cháng)的細胞,如間充質(zhì)干細胞 (MSC),這種水凝膠細胞珠培養方法是替代微載體進(jìn)行 3D 細胞放大的方法。由于具有優(yōu)良的介質(zhì)和氧氣滲透性,在水凝膠珠中培養的細胞可以在長(cháng)期培養中保持高細胞活力。該方法適用于我們所有即用型 VitroGel 和高濃度 VitroGel 系統。 VitroGel 水凝膠細胞珠培養物產(chǎn)生的細胞可以通過(guò) VitroGel 細胞回收溶液收獲。

可注射載體

VitroGel 是一種出色的動(dòng)物注射用注射載體。在機械剪切力(例如通過(guò)注射器注射)的作用下,水凝膠發(fā)生凝膠-溶膠轉變并變成自由流動(dòng)狀態(tài)。然而,一旦剪切力停止,水凝膠的機械強度可以通過(guò)溶膠-凝膠轉變迅速恢復并再次變成水凝膠狀態(tài)。憑借這種可注射特性,VitroGel 可用于 體內細胞/藥物遞送,以進(jìn)行細胞治療或控釋。只需在室溫下將水凝膠溶液與細胞/化合物混合,水凝膠即可在 20 分鐘內準備好注射。除了即用型 VitroGel 之外,研究人員還可以使用 VitroGel 高濃度水凝膠來(lái)獲得不同水凝膠強度的可注射水凝膠。

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