哪種營(yíng)養素/生長(cháng)因子更適合我的細胞培養？

細胞培養是一種不斷發(fā)展的實(shí)踐，對再生醫學(xué)產(chǎn)生巨大影響。細胞培養過(guò)程依賴(lài)于對影響培養結果的培養條件的精確調整。每種細胞類(lèi)型都需要一組特定的信號才能有效生長(cháng)。此外，所有細胞類(lèi)型都需要基本營(yíng)養物質(zhì)和培養基成分。因此，一些培養基成分是通用的，而另一些則根據細胞類(lèi)型而特定。

維持細胞增殖的通用培養基成分

這是維持細胞增殖的通用培養基成分列表。

• 能量：來(lái)自碳水化合物或糖，是維持細胞新陳代謝所必需的。

• 必需金屬和礦物質(zhì)：例如鈣、鎂、鐵和其他微量金屬是調節代謝途徑和細胞過(guò)程所必需的。

• 緩沖劑：磷酸鹽、醋酸鹽和檸檬酸鹽維持 pH 水平，中和代謝活動(dòng)產(chǎn)生的酸化。

• 營(yíng)養素：由維持細胞途徑和信號傳導所需的蛋白質(zhì)（或其組成部分：肽和氨基酸）或生長(cháng)因子組成。培養基的這種成分根據細胞類(lèi)型而變化，并且可以根據特定需要進(jìn)行定制。下面概述了一些主要細胞類(lèi)型及其所需營(yíng)養的詳細信息。

培養基還可能含有其他成分，例如 pH 變化指示劑、選擇性抗菌劑和促進(jìn)細胞培養實(shí)踐的膠凝劑。雖然這些培養基成分不直接影響細胞增殖，但會(huì )影響細胞培養性能。

誘導多能干細胞 (iPSC) 和成纖維細胞生長(cháng)因子 2 (FGF2)

多能干細胞

多能干細胞可以自我更新，并且可以分化成幾乎任何其他細胞類(lèi)型，包括神經(jīng)元、心血管細胞、肝細胞、上皮細胞等。iPSC是一種特定的干細胞類(lèi)型，是通過(guò)將體細胞重編程為多能干細胞狀態(tài)而產(chǎn)生的。生長(cháng)因子影響 iPSC 的增殖或分化行為。 FGF2 發(fā)出 iPSC 作為未分化細胞增殖的信號。

FGF生長(cháng)因子

FGF2調節絲裂原激活蛋白激酶 (MAPK)/細胞外信號調節激酶 (ERK) 通路 [ 2 ]，這些通路對于細胞信號級聯(lián)反應至關(guān)重要，包括調節細胞增殖和分化的信號級聯(lián)反應。 FGF2 減少自發(fā)分化，從而維持可無(wú)限擴增的 iPSC 培養物。因此，FGF2 是維持 iPSC 培養的關(guān)鍵生長(cháng)因子。

神經(jīng)元細胞、腦源性神經(jīng)營(yíng)養因子 (BDNF) 和膠質(zhì)細胞源性神經(jīng)營(yíng)養因子 (GDNF)

神經(jīng)元干細胞

神經(jīng)元是一種重要的細胞類(lèi)型，可以發(fā)送信息來(lái)控制整個(gè)身體的基本功能。神經(jīng)元通常存在于腦組織中，可以由干細胞產(chǎn)生。多能細胞首先分化為神經(jīng)祖細胞（NPC），進(jìn)一步分化為神經(jīng)元。 iPSC 衍生的 NPC 隨后可用于構建 3D 結構圖案，例如大腦類(lèi)器官。生長(cháng)因子信號傳導維持神經(jīng)元生長(cháng)并指導生成的神經(jīng)元類(lèi)型。 BDNF 和 GDNF 是神經(jīng)元分化和增殖的兩種關(guān)鍵生長(cháng)因子。

BDNF生長(cháng)因子

BDNF激活多種途徑，包括 MAPK、磷脂酶 Cy 和磷脂酰肌醇 3 激酶途徑，調節神經(jīng)元存活和分化所需的蛋白質(zhì)轉錄。 [ 3 ]。 BDNF 促進(jìn)神經(jīng)元存活、軸突伸長(cháng)和分支、樹(shù)突棘形成和神經(jīng)元可塑性。

GDNF生長(cháng)因子

GDNF激活促進(jìn)細胞增殖的通路，包括 MAPK、磷酸肌醇 3-激酶、ERK 和 ATK 通路 [ 4 ]。 GDNF 促進(jìn)多巴胺能神經(jīng)元、運動(dòng)神經(jīng)元和皮質(zhì)神經(jīng)元的存活，并增強背根神經(jīng)節的軸突伸長(cháng)和分支。

BDNF、GDNF、iPSC 和 NPC

BDNF 和 GDNF 用于將 iPSC 和 NPC 分化為神經(jīng)元并維持高質(zhì)量的后代。這些生長(cháng)因子還可用于維持 3D 神經(jīng)元類(lèi)器官并顯著(zhù)驅動(dòng)類(lèi)器官圖案化。

視網(wǎng)膜色素上皮 (RPE) 細胞、FGF2 和表皮生長(cháng)因子 (EGF)

視網(wǎng)膜色素上皮干細胞

RPE 細胞是在眼睛感光層后面發(fā)現的單層細胞。它們執行許多支持神經(jīng)元視網(wǎng)膜上的感光細胞的功能，包括類(lèi)維生素A的轉換和儲存、散射光的吸收、微環(huán)境的維持和營(yíng)養的提供[ 5 ]。 RPE 細胞以單層形式生長(cháng)，一旦生長(cháng)填滿(mǎn)其邊界區域，就可以長(cháng)時(shí)間保持靜止狀態(tài)。這使得 RPE 細胞能夠承受高壓力條件。

FGF2 和 EGF 生長(cháng)因子

FGF2通過(guò)上述 iPSC 途徑促進(jìn) RPE 細胞增殖。EGF激活多種途徑，包括 ERK MAPK、AKT-PI3K 和 PLC-γ1-PKC 途徑，調節增殖并防止不必要的細胞凋亡 [ 6 ]。這使得 EGF 能夠確保 RPE 細胞在靜止期存活。 FGF2 和 EGF 是維持 RPE 細胞并為其生長(cháng)創(chuàng )造壓力最小的環(huán)境的關(guān)鍵生長(cháng)因子。在特定條件下生長(cháng)的 RPE 細胞現在被移植以治療黃斑變性。