與豬、牛、山羊、綿羊、豚鼠、兔、驢 IGFBP 發(fā)生反應(yīng)
檢測人類樣本中的 IGFBP 和 IGF 受體。牛、豬、兔、豚鼠、綿羊、驢和山羊血清樣品也獲得了類似的結(jié)果。大鼠和小鼠血清在硝酸纖維素膜上僅獲得微弱條帶(參見:小鼠/大鼠蛋白質(zhì)印跡試劑盒)。
試劑盒的試劑足以制備每個步驟中每種試劑250ml。這足以容納 500 平方厘米的印跡膜。試劑盒中的每種試劑也可單獨購買。
Reagent | Description | Quantity | Product Code |
A | 0.5 ml Biotinylated ligand: biotinylated human IGF-II, dilute 1 : 100 to 1 : 500 | 10 ug | BioIGF2-10 |
B | Quenching Buffer, 2-fold conc. | 125 ml | QB-125 |
C | Blocking/Dilution Buffer, 10 - fold conc. | 75 ml | BDB-75 |
D | Washing Buffer, 20-fold conc. | 125 ml | Product Code: WB-125 |
E | Streptavidin-POD-Conjugate, dilute 1:2500 - 1:5000 | 125 ?µl | Product Code: SPCON |
Detailed working instructions | Application Note IGF005 | ||
Human Western-ligand Blot | 1 Kit | Product Code: human-WLB |
我們的套件不提供基材,您可以使用常用的基材
我們已經(jīng)成功測試了其他基材,例如 KPL、Pierce、GE Healthcare、Seramun、Kem-en-tec。
我們開發(fā)了一種緩沖系統(tǒng),使我們手中的硝酸纖維素膜具有最佳的靈敏度,并且即使在室溫下也具有長期的穩(wěn)定性。也可以使用其他緩沖區(qū),但有一些限制:
如果您使用牛血清白蛋白 (BSA) 進行封閉和/或稀釋,請注意其質(zhì)量。許多 BSA 制劑含有微量 IGFBP,這可能會影響 WLB 的質(zhì)量(背景/信號比)。
文獻中描述牛奶含有生物素化蛋白質(zhì),這可能會影響 WLB 的質(zhì)量(背景/信號比)。我們測試了來自不同供應(yīng)商和當?shù)爻械拿撝谭?,沒有發(fā)現(xiàn)生物素化蛋白質(zhì)。