蛋白質(zhì)測定通常用于許多研究領(lǐng)域，以在大量緩沖液和條件下評估蛋白質(zhì)。研究人員面臨的一個主要問題是從市場上的大量選擇中選擇一種與他們的蛋白質(zhì)樣品兼容的蛋白質(zhì)檢測方法。CB-X蛋白質(zhì)分析解決了這個問題，因?yàn)樗O(shè)計(jì)為與蛋白質(zhì)分離、儲存和分析中所有常用的緩沖液和條件兼容。
對于簡單、不復(fù)雜的水性緩沖液中的蛋白質(zhì)樣品，CB-X是一種高靈敏度的單試劑檢測方法，可在5分鐘內(nèi)完成。CB-X蛋白質(zhì)分析使用的蛋白質(zhì)染料是對布拉德福德考馬斯染色試劑的改進(jìn)（圖1） 對于復(fù)雜的蛋白質(zhì)樣品，CB-X蛋白質(zhì)分析配備了用于清潔樣品的試劑，并去除所有干擾精確蛋白質(zhì)估計(jì)的試劑和化學(xué)物質(zhì)（圖1）。這些試劑包括去污劑、離液劑、還原劑、烷化劑、糖、高鹽濃度、緩沖劑和螯合劑（表1）。凈化階段和隨后的蛋白質(zhì)分析在單個試管中進(jìn)行，以確保無蛋白質(zhì)損失并保持分析的準(zhǔn)確性。圖2展示了1% Triton X-100或1% SDS存在時CB-X的效果。

如果蛋白質(zhì)樣品不含干擾物質(zhì)，則進(jìn)行簡單的單試劑檢測，以給出線性響應(yīng)。如果存在干擾物質(zhì)或產(chǎn)生人為結(jié)果，則用凈化試劑處理蛋白質(zhì)樣品，并檢測蛋白質(zhì)以產(chǎn)生線性響應(yīng)。

CB-X蛋白質(zhì)檢測隨特定批次的CB-X表格一起提供。這使得研究人員可以進(jìn)行單個蛋白質(zhì)的清理和后續(xù)分析，然后在CB-X表中查找它們的吸光度以找到蛋白質(zhì)濃度。CB-X工作臺消除了對多種蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)品的需求，節(jié)省了大量時間和精力。該表是由一種復(fù)雜的蛋白質(zhì)混合物制成的，與哺乳動物、植物、細(xì)菌和酵母來源的蛋白質(zhì)相當(dāng)。該檢測配有牛血清白蛋白標(biāo)準(zhǔn)品或非動物蛋白標(biāo)準(zhǔn)和貓一起。# 786-12X或786-894，分別用于在單獨(dú)使用CB-X檢測染料時生成曲線，或用于喜歡根據(jù)特定條件生成自己的標(biāo)準(zhǔn)曲線或CB-X表格的研究人員。

CB-X蛋白質(zhì)檢測在每次檢測0.5-50 g的范圍內(nèi)是可靠的。常規(guī)大小的試劑盒包含足夠用于500次蛋白質(zhì)分析的CB-X分析染料和足夠用于250次凈化的凈化試劑。

 表1: CB-X蛋白質(zhì)分析與許多干擾試劑兼容 

特征

• 清潔步驟去除了所有干擾因素，包括洗滌劑和離液劑，從而提高了準(zhǔn)確性
• 在單個試管中進(jìn)行凈化和分析，以確保無蛋白質(zhì)損失
• 敏感:0.5-50克線性響應(yīng)
• 高可靠性和再現(xiàn)性
• 長保質(zhì)期-穩(wěn)定12個月

應(yīng)用程序

• 適用于大多數(shù)樣品（包括有問題的樣品）的改良、靈敏的布拉德福德檢測，與所有常見的實(shí)驗(yàn)室試劑兼容
• CB-X已被廣泛應(yīng)用于各種技術(shù)中（參考。1-6）和應(yīng)用包括:
• 蛋白質(zhì)估計(jì)在蛋白質(zhì)純化、電泳、免疫分析、細(xì)胞生物學(xué)、分子生物學(xué)和其他研究中的應(yīng)用
• 含有常見實(shí)驗(yàn)室試劑、去污劑溶解的膜蛋白和稀釋蛋白溶液的蛋白質(zhì)樣品