對于細(xì)胞學(xué)染色,您實際上是在三種蘇木精染色之一之間進行選擇:Gill 1X 蘇木精、Gill 2X 蘇木精和Harris 蘇木精,酸化。以下是您如何為細(xì)胞學(xué)染色選擇最佳蘇木精,以及實驗室技術(shù)人員選擇的兩種最常見染色的方案。
一般來說,漸進式吉爾蘇木精適合評估細(xì)胞學(xué)標(biāo)本。最常見的是,我們推薦 Gill 1X,因為它被認(rèn)為是 Gill 蘇木精染色劑中最淺的染色劑。它可以補充 OG 和 EA 染色,而不會過度染色標(biāo)本。有時,我們發(fā)現(xiàn) Gill 2X 蘇木精(例如當(dāng)您分析細(xì)胞學(xué)樣本中的癌細(xì)胞、感染或其他細(xì)胞異常時)是正確的選擇。這很大程度上取決于病理學(xué)家的偏好;如果她或他喜歡深紫色染色,Gill 2X 蘇木精會更合適。
Harris 酸化蘇木精也常用于細(xì)胞學(xué)染色,并且可以逐步使用以產(chǎn)生可接受的結(jié)果。與 Gill's 1X 蘇木精相比,這會產(chǎn)生更深的染色。
在我們的帖子“如何設(shè)置和進行 H&E 染色"中查找這些蘇木精染色方案。
細(xì)胞學(xué)標(biāo)本,例如巴氏涂片或支氣管清洗/刷子,通常適合使用 Gill 1X 蘇木精染色。這種漸進染色劑呈淺紫色,可補充方案中的 OG 和 EA 染色劑,而不會過度染色樣本。對于這種樣本類型,很少有比 1X Gill Hematoxylin 更強烈的染色。
Gill's 1X 和 2X 蘇木精細(xì)胞學(xué)染色方案
在 95% 乙醇中固定細(xì)胞涂片:15 分鐘
用去離子水輕輕沖洗:30 秒
在蘇木精溶液中染色,Gill 1X 或 Gill 2X:1? 至 3 分鐘
用去離子水輕輕沖洗:1 分鐘
上藍(lán)試劑:15 至 60 秒
用去離子水輕輕沖洗:30 秒
95% 乙醇:浸 10 次
巴氏染色 OG-6:1 至 2 分鐘
試劑酒精,95%:浸 10 次
巴氏染色 EA 50 或巴氏染色 EA 65 EA:2? 至 3 分鐘
注:數(shù)字表示染料的比例。婦科樣本使用 EA 50; EA 65 用于非婦科樣本。
95% 乙醇,兩次更換:每次浸泡 10 次
100% 乙醇,兩次更換:每次 1 分鐘
二甲苯或二甲苯替代品,兩次更換:每次 1 分鐘
使用丙烯酸封片劑蓋玻片,并在顯微鏡下檢查
先進的哈里斯蘇木精、細(xì)胞學(xué)酸化方案以及其他幾個方案可在我們的《常見實驗室生物染色快速參考指南》中找到。今天就下載吧!
如果您在處理細(xì)胞學(xué)和組織學(xué)標(biāo)本的實驗室工作,那么您可能需要考慮使用不止一種染色劑:例如,Gill 1X 蘇木精(用于細(xì)胞學(xué))和 Gill's 3X 蘇木精或 Harris(用于組織學(xué))。確定病理學(xué)家的偏好,并根據(jù)這些指南選擇適合需要的染色劑。